如何使用基因工程的方法合成人胰岛素

190 2023-12-14 04:06

一、如何使用基因工程的方法合成人胰岛素

1获得人的胰岛素基因

使用内切酶将目的基因从原DNA中分离从DNA中提取胰岛素基因,获得人的胰岛素基因

2提取质粒

使用细胞工程 培养大肠杆菌,从大肠杆菌的细胞质中提取质粒,

3将目的基因导入质粒经行基因重组

使用内切酶(与目的基因有相同粘性末端的内切酶)将质粒切开,再使用DNA连接酶将目的基因与质粒缝合,形成一个能表达出胰岛素的基因的重组质粒

4将重组质粒导入到受体细胞中

杆菌的培养液中加入含有Ca+的物质,如CaCl2。这使细胞变成感受态细胞。这样的细胞会吸收外源基因。 此时将重组的质粒也放入培养液中, 大肠杆菌便会将重组质粒吸收。

5目的基因在受体细胞中表达

在大肠杆菌内,质粒通过表达转录与翻译后,通过大肠杆菌的大量繁衍,便可大量生产出胰岛素。

二、双向薄层层析法介绍

将展开剂按比例混合加入层析缸 , 展开剂的量以淹没薄板8~10 mm 为宜。第一相展开结束后 , 取出薄板放置一段时间 , 使展开剂自然挥发。进行第二相展开。两相前沿垂直成直角。

三、薄层层析为什么不能浸样点并要盖盖

斑点随着溶剂上行展开是要扩散的。初始斑点过大,展开后会与其他斑点重合,影响实验准确性。

还会产生拖尾,影响实验精度。

对于多成分物质,斑点会重叠的很严重。

四、胰岛素预混50和预混30什么区别.可以混用吗

诺和灵50R是含有50%短效R,和50%中效N,针对餐后血糖升高,基础血糖还可以的患者

诺和灵30R,是含有30%短效R和70%中效N,针对餐后血糖和基础血糖相差值不是很大的患者,可以说,强调一些基础血糖的控制

目前还有胰岛素类似物诺和锐30,很有效的控制餐后血糖和基础血糖,最重要的是可以在注射以后就吃饭,不用像人胰岛素需要在注射以后等待半个小时再吃饭,更方便灵活。

五、重组人胰岛素是干什么用的?

糖尿病。

人工合成的重组胰岛素相比动物胰岛素,不容易产生抗体,胰岛素利用率比较高,有利于控制血糖。

六、重组人胰岛素注射液r是短期药吗

重组人胰岛素分短效(R表示)、中效(N表示),和预混(是短效和中效按比例混合到一起,如30%的短效,70%的中效称为30R、短效和中效均为50%时称为50R)三类。因此重组人胰岛素注射液R是短效胰岛素。

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